陈建萍,王萍,杨庚萍,欧阳少波,黄自坤.MicroRNA-21调控口腔鳞癌细胞顺铂耐药及其作用机制[J].实用中西医结合临床,2015,15(12): |
MicroRNA-21调控口腔鳞癌细胞顺铂耐药及其作用机制 |
Expressions of microRNA-21 in oral squamous cell carcinoma and its correlation with drug resistance by targeting PTEN |
投稿时间:2015-08-26 修订日期:2015-08-26 |
DOI: |
中文关键词: 口腔鳞癌 微小RNA-21 顺铂 耐药 PTEN |
英文关键词: Oral squamous cell carcinoma microRNA-21 Cisplatin Drug resistance PTEN |
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中文摘要: |
目的 探讨microRNA-21 (miRNA-21)在人口腔鳞癌顺铂耐药细胞中的表达及其作用机制。方法 采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测miRNA-21在口腔鳞癌细胞株Tca8113及顺铂耐药细胞株Tca8113/DDP的表达;采用体外转染法将miRNA-21模拟物(mimics)或抑制物(inhibitor)分别转染Tca8113和Tca8113/DDP细胞,采用RT-PCR检测转染前后细胞中miRNA-21的表达情况;采用CCK8实验检测转染前后细胞对顺铂敏感性的变化;并用Westem blot检测转染前后细胞中PTEN的表达变化。采用双荧光素酶报告基因验证miRNA-21是否作用于PTEN基因的3’-UTR区预测靶位。结果 miRNA-21在Tca8113/DDP细胞中的表达水平是Tca8113细胞的(8.26±1.37)倍(P<0.01)。Tca8113细胞转染miRNA-21 mimics后,细胞中miRNA-21表达水平是转染前的(10.51±2.18)倍(P<0.01),顺铂对Tca8113细胞增殖的抑制率较转染前明显下降(P<0.05),细胞内PTEN表达水平较转染前明显下降(P<0.05)。Tca8113/DDP细胞在转染miRNA-21 inhibitor后,细胞中miRNA-21表达水平是转染前的(0.32±0.14)倍(P<0.01),顺铂对Tca8113/DDP细胞增殖的抑制率与转染前比较明显增加(P<0.05),细胞内PTEN表达水平较转染前明显增高(P<0.05)。经双荧光素酶报告基因验证PTEN是miRNA-21的靶基因。结论 miRNA-21在口腔鳞癌顺铂耐药细胞Tca8113/DDP中异常高表达,下调其表达可部分逆转细胞耐药性,miRNA-21可能通过作用于PTEN参与口腔鳞癌细胞顺铂耐药的发生和发展。 |
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